人類白細(xì)胞抗原 B27檢測方法及意義
HLA是組織細(xì)胞上受遺傳控制的個(gè)體特異性抗原，zui早是在白細(xì)胞和血小板上發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)該抗原廣泛分布于皮膚、腎、脾、肺、腸和心等組織器官有核細(xì)胞的細(xì)胞膜上。第8次組織相容性會(huì)議確定HLA有92個(gè)，分屬于A、B、C、D和DR5個(gè)位點(diǎn)，分別稱為HLA-A，HLA-B，HLA-C，HLA-D和HLA-DR。HLA-B位點(diǎn)有42個(gè)，B27為其中之一。現(xiàn)已證明HLA-B27陽性者比HLA-B27陰性者發(fā)生強(qiáng)直性脊柱炎的機(jī)會(huì)要大得多。
2 HLA B27檢測意義
臨床意義：強(qiáng)直性脊柱炎病人HLA-B27的陽性率為90%。瑞特綜合征的陽性率為80%。有報(bào)導(dǎo)說，HLA-B27陽性的正常人中大約有8%日后發(fā)展為強(qiáng)直性脊柱炎的可能。
3 本試劑盒采用檢測方法
本試劑盒采用TaqMan 的熒光PCR方法，結(jié)合序列特異性PCR(PCR-SSP)技術(shù)。從GenBank中選取已公布的所有HLA亞型，進(jìn)行序列比對后設(shè)計(jì)一對特異性引物和一條特異性熒光探針，既提高了檢測靈敏度、準(zhǔn)確性，又使檢測簡便快速，反應(yīng)結(jié)束后直接分析判讀，無需電泳檢測。
4 試劑盒性能參數(shù)
便捷性：本試劑盒采用堿裂解法提取外周血DNA，操作過程方便快捷，從提取到結(jié)果判斷全程耗時(shí)小于90分鐘，適用于市面上的多款熒光PCR儀。
準(zhǔn)確性：對檢測出150例陽性標(biāo)本進(jìn)行測序分析，準(zhǔn)確性達(dá)到100％。
靈敏度：zui低檢測約為1000 Copies/ml，對DNA的要求濃度低，線性范圍1×103-1×109，重現(xiàn)性好。
特異性：與One Lamda HLA B27試劑進(jìn)行比較，結(jié)果一致性達(dá)到99.4%(359/361)。
安全性：本試劑盒采用PCR－熒光探針技術(shù)，避免了PCR-SSP單一技術(shù)擴(kuò)增后產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳EB染色，避免了致癌物質(zhì)接促及PCR產(chǎn)物污染等問題。
強(qiáng)直性脊柱炎B27檢測試劑盒（磁酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：HLA-B27 Assay Kit
【包裝規(guī)格】
48人份/盒
【簡 介】
HLA-B27與強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）強(qiáng)相關(guān)。AS在我國的患病率為0.3%，其中90%-98%的患者出現(xiàn)HLA-B27陽性。因此，B27的檢測對排除AS的診斷有輔助作用并有助于早期發(fā)現(xiàn)B27抗原的存在，對于患者及早進(jìn)行相應(yīng)的干預(yù)措施具有指導(dǎo)意義。本試劑盒提供含有抗HLA-B27抗體的磁珠，特異性針對人白細(xì)胞抗原B27。
【預(yù)期用途】
本試劑盒主要用于檢測人全血中B27抗原是否存在，作為強(qiáng)直性脊柱炎的鑒別診斷。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒應(yīng)用磁珠分離法，在高品質(zhì)磁珠上耦聯(lián)B27抗體，與全血中白細(xì)胞上的B27抗原反應(yīng)，同時(shí)，加入HRP標(biāo)記的抗體聯(lián)結(jié)至白細(xì)胞上。經(jīng)洗滌后，磁珠上含有B27抗原的細(xì)胞和酶均被保留下來。加入底物液顯色，終止反應(yīng)后在酶標(biāo)儀450nm讀取吸光度值。
【主要組成成份】
本試劑盒包含以下組分：
（REF PC-01A）
孔內(nèi)包被HLA-B27磁珠的抗體，微孔板條6×8孔條，包裝于帶干燥劑的鋁箔袋中。
含HRP標(biāo)記的抗細(xì)胞抗體，每瓶60µl。
用于稀釋酶結(jié)合物，每瓶3ml。
含吐溫的磷酸緩沖液，每瓶10ml。
每瓶3 ml。
每瓶3 ml。
每瓶300 ul 。
每瓶300 ul。
每瓶3 ml。
10. 微孔板架 1個(gè)
11．文件 說明書1份
【儲(chǔ)存條件及有效期】
試劑盒儲(chǔ)存于2-8℃可保存至試劑盒上所標(biāo)示的zui后有效期日。
未使用完的微孔板條應(yīng)放回至有干燥劑的鋁箔袋中，將鋁箔袋折好并密封于塑料封口袋中，2-8℃下可保存8周。
洗液開封后在室溫下可保存8周。
【樣本采集和保存條件】
EDTA-K3抗凝的全血樣本（靜脈采血），已打開過的、已污染的、已溶血的、已凝結(jié)的血液樣本可能引起不一致的測試結(jié)果，應(yīng)避免使用。不能立即使用的樣本應(yīng)靜置（豎立）保存于2-8ºC，不超過5天使用。
【額外需要的材料和設(shè)備】
1. EDTA-K3抗凝管
2. 可調(diào)微量移液槍0.5-10ul，20-200ul，八道加樣槍和槍頭
3. 磁板（可重復(fù)使用）
4. 振蕩器
5. 計(jì)時(shí)器
6. 能夠測量波長為450nm的酶標(biāo)儀
7. 去離子水
8. 真空負(fù)壓泵（可選項(xiàng)，洗板時(shí)使用，有助于實(shí)現(xiàn)洗板*）
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
檢測步驟
注：底物液易受污染，僅移取檢測時(shí)所需的量，未用完的底物液須丟棄。
【參考值（參考范圍）】
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考范圍。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
OD值在0.4-0.8，請重復(fù)實(shí)驗(yàn)，必要時(shí)用其它方法驗(yàn)證。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
批內(nèi)差異：≤15%
批間差異：≤15％
準(zhǔn)確性：檢測陰性和陽性對照吸光度，測試結(jié)果應(yīng)在其允許范圍內(nèi)。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
診斷結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者的臨床癥狀和醫(yī)師其他的實(shí)驗(yàn)室的檢查進(jìn)行分析。
【注意事項(xiàng)】
適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和手套。
咨詢電話